Aparición de Mycobacterium orygis

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La tuberculosis causada por Mycobacterium orygis se detectó en 2 ciervos manchados de un santuario de vida silvestre en el oeste de la India y en un bisonte indio de un parque nacional en el centro de la India. Se requiere urgentemente vigilancia a nivel nacional para aclarar la epidemiología del complejo Mycobacterium tuberculosis en la interfaz entre humanos, ganado y vida silvestre.

La tuberculosis (TB) causada por Mycobacterium orygis ha sido reportada en humanos, ganado y, raramente, en animales salvajes en la India (1–3). Informamos 3 casos de TB asociada a M. orygis en animales salvajes de entre 85 muertes inexplicables examinadas como parte de las investigaciones de enfermedades entre febrero de 2016 y marzo de 2020, que también revelaron casos de bronconeumonía supurativa (n = 32), TB causada por M. tuberculosis o M. bovis (n = 29), neumonía verminosa (n = 9), granulomas fúngicos (n = 6) y neoplasias (n = 6).

En febrero de 2016, dos ciervos manchados adultos criados en libertad (un macho [caso 1] y una hembra [caso 2]) fueron encontrados muertos en el Santuario de Vida Silvestre Girnar, Gujarat, India occidental. El examen post-mortem reveló nódulos de color amarillo pálido coalescentes, multifocales, no uniformes, incrustados en el parénquima de los pulmones con material caseoso de color blanco amarillento y agrandamiento del hígado y ganglios linfáticos mesentéricos con nódulos superficiales. En enero de 2017, un bisonte macho adulto demacrado (caso 3) fue encontrado muerto en el Parque Nacional Bandhavgarh, Madhya Pradesh, India central. Al igual que el venado, el bisonte tenía nódulos caseosos blancos de tamaño variable en la pleura visceral, el parénquima pulmonar superficial y los ganglios linfáticos pulmonares.

Para investigar el agente causal, se recogieron tejidos de los pulmones, el hígado y los ganglios linfáticos en hielo y formalina tamponada neutra al 10 % y se procesaron para histopatología, tinción de Ziehl-Neelsen y aislamiento del cultivo. El examen histopatológico de estos tejidos reveló grandes granulomas con extensa necrosis caseosa y múltiples áreas calcificadas rodeadas de células epitelioides, linfocitos, células gigantes y fibroblastos (más abundantes en el caso 3). Los bacilos acidorresistentes eran abundantes (50-75/campo de inmersión en aceite), tanto extracelularmente como dentro de los macrófagos. Cultivamos todas las muestras por triplicado en medios Löwenstein-Jensen con glicerol y en Löwenstein-Jensen con piruvato de sodio, lo que reveló colonias húmedas, suaves y granulares (4). El cribado primario de aislados bacterianos mediante PCR multiplex de un solo tubo que se dirige al ARNr 16S, específico para el género Mycobacterium, y los genes MPB70, específicos para miembros de MTBC, confirmó que los aislados eran MTBC (5). Realizamos más PCR en las muestras positivas para MTBC para determinar la presencia o ausencia de regiones genómicas de diferencia (RD4 y RD9) utilizando cebadores publicados (6); esta prueba indicó la ausencia de RD9 y la presencia de RD4, excluyendo así la posibilidad de M. tuberculosis, M. canetti, M. bovis o M. bovis BCG en los 3 casos.

Para determinar las especies exactas de MTBC involucradas y sus similitudes genéticas con las cepas que afectan al ganado y a los humanos que circulan en la India, realizamos una secuenciación del genoma completo de extremos emparejados en la plataforma Illumina MiSeq (https://www.illumina.com). La presencia de marcadores genéticos estándar para M. orygis (RD1, RD4 y Rv044c) y la ausencia de RD9 y RD12 confirmaron nuestras secuencias como M. orygis. Enviamos los datos del genoma completo generados a la base de datos del Archivo de lectura de secuencias del Centro Nacional de Información Biotecnológica bajo los números de acceso. SRX15482219 (caso 1), SRX6969199 (caso 2) y SRX6969201 (caso 3).

Cifra

Cifra. Filogenia de aislamientos de vida silvestre de Mycobacterium orygis recién secuenciados de 3 animales salvajes en India (estrella negra, bisonte; estrellas azules, ciervo) y secuencias de referencia. El círculo exterior muestra la distribución de...

Comparamos filogenéticamente las secuencias generadas en este estudio con otras secuencias de M. orygis disponibles. Los patrones filogenéticos de ramificación sugieren que el aislado del ciervo manchado del caso 1 estaba genéticamente más cerca del aislado recuperado del bisonte (caso 3) que el aislado del ciervo del caso 2 (Figura). La diferencia promedio por pares entre todos los aislamientos en este estudio fue 272; fue de 73 entre los aislados. La diversidad restringida observada entre varios de los aislamientos recientemente descritos, incluidos los recuperados de la vida silvestre en libertad, es digna de mención y requiere futuras investigaciones.

Recientemente, M. orygis ha surgido como una amenaza zoonótica en el sur de Asia (7); Se han informado casos multiespecíficos en la India que involucran humanos, ganado lechero y ungulados salvajes (1–3,7,8). Los estudios de Nepal y Bangladesh también han revelado la circulación de M. orygis en animales silvestres y ganado en libertad, lo que indica la posibilidad de M. orygis en el sistema de vida silvestre multihuésped de la India (9). Los informes sobre la transmisión de la infección por M. orygis de un trabajador agrícola de origen indio al ganado en Nueva Zelanda (10) y la confirmación de M. orygis en 10 pacientes humanos en el sur de Asia (2) implican endemicidad en la región, destacando la urgencia necesidad de investigaciones epidemiológicas genómicas.

Reportamos la circulación de M. orygis en poblaciones de vida silvestre en libertad en la India, lo que sugiere una amenaza inexplorada para la conservación de la vida silvestre en regiones donde coexisten varias especies en peligro de extinción. En este estudio se desconoce la dinámica de transmisión de M. orygis; sin embargo, es posible que se hayan producido episodios indirectos y indirectos debido al espacio y los recursos compartidos en la interfaz entre el ganado, la vida silvestre y los seres humanos. En India, la explosión de la población humana ha llevado a la invasión de áreas forestales y a la reducción de los hábitats de la vida silvestre, lo que ha aumentado la amenaza de transmisión de patógenos entre la vida silvestre, el ganado y los humanos. Aunque no se ha definido la epidemiología, el análisis filogenético de nuestro estudio y los informes anteriores indican que M. orygis parece estar circulando en poblaciones de animales salvajes, humanos y ganado en la India. A la luz de la Estrategia para poner fin a la tuberculosis de la Organización Mundial de la Salud, se deben realizar exámenes de detección y vigilancia continua a nivel nacional bajo el paraguas del enfoque Una sola salud para combatir esta enfermedad zoonótica mortal.

El Dr. Sharma está cursando un doctorado en la división de Patología Veterinaria del Consejo Indio de Investigación Agrícola—Instituto Indio de Investigación Veterinaria (IVRI). Sus principales intereses de investigación son la epidemiología y la patología de las enfermedades del ganado, las aves de corral y la vida silvestre.

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Agradecemos al director del Consejo Indio de Investigación Agrícola—Instituto Indio de Investigación Veterinaria, los departamentos forestales de Madhya Pradesh y Gujarat y la Autoridad Central del Zoológico, Gobierno de la India por proporcionar los permisos necesarios para realizar esta investigación.

Este estudio recibió una contribución financiera del Departamento de Biotecnología, Ministerio de Ciencia y Tecnología, Gobierno de la India (subvención n.° BT/ADV/Bovine Tuberculosis/2018).

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DOI: 10.3201/eid2903.221228

Fecha de publicación original: 14 de febrero de 2023

Índice – Volumen 29, Número 3—Marzo de 2023

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Utilice el siguiente formulario para enviar correspondencia a los autores o póngase en contacto con ellos en la siguiente dirección:

Karikalan Mathesh, Center for Wildlife, ICAR-Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar- 243122, Uttar Pradesh, India

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